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簡(jiǎn)要描述:BE(2)-M17M17 人神經(jīng)母細胞瘤細胞,原代細胞|細胞系|細胞株|菌種;細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養條件!
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BE(2)-M17M17 人神經(jīng)母細胞瘤細胞
培養條件:
*培養基:DMEM高糖培養基90%;胎牛血清10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
BE(2)-M17M17 人神經(jīng)母細胞瘤細胞傳代方法:
收到細胞后,取出培養瓶在倒置顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況。
(一)如果細胞未長(cháng)滿(mǎn),用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無(wú)菌操作,打開(kāi)細胞培養瓶,吸出培養液,僅留下10ml培養液在瓶?jì)壤^續培養。
(二)如果細胞已長(cháng)滿(mǎn),即可進(jìn)行傳代培養。具體步驟如下:
1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,倒轉放于37度培養箱1-3分鐘預熱,然后又將培養瓶倒轉大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養培養瓶,細胞隨即脫落下來(lái)。
3. 加入6-8ml*培養基,吸出,分到新的培養瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天1次。
。
BE(2)-M17M17
注意:傳代后一半用我們的培養基,一半用你們的,以免細胞不適應而造
成生長(cháng)不好。
凍存方法: 凍存液:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
BE(2)-M17M17
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